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光是一種電磁波,具有一定的波長和頻率。可見光的波長范圍在400~760nm，紫外光為200~400nm，紅外光為760~500000nm。可見光因波長不同呈現不同顏色，這些波長在一定范圍內呈現不同顏色的光稱單色光。太陽或鎢絲等發出的白光是復合光，是各種單色光的混合光。利用棱鏡可將白光分成按波長順序排列的各種單色光，即紅、橙、黃、綠、青、藍、紫等，這就是光譜。有色物質溶液可選擇性地吸收一部分可見光的能量而呈現不同顏色，而某些無色物質能特征性地選擇紫外光或紅外光的能量。物質吸收由光源發出的某些波長的光可形成吸收光譜，由于物質的分子結構不同，對光的吸收能力不同，可見分光光度計因此每種物質都有特定的吸收光譜，而且在一定條件下其吸收程度與該物質的濃度成正比，分光光度法就是利用物質的這種吸收特征對不同物質進行定性或定量分析的方法。
在比色分析中，有色物質溶液顏色的深度決定于入射光的強度、有色物質溶液的濃度及液層的厚度。當一束單色光照射溶液時，入射光強度愈強，溶液濃度愈大，液層厚度愈厚，溶液對光的吸收愈多，它們之間的關系，符合物質對光吸收的定量定律，即Lambert-Bear 定律。這就是分光光度法用于物質定量分析的理論依據。
可見分光光度計注意事項
1、該儀器應放在干燥的房間內，使用時放置在堅固平穩的工作臺上，室內照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發亮不穩定。
2、使用本儀器前，使用者應該首先了解本儀器的結構和工作原理，以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前，應該對儀器的安全性能進行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調節旋鈕的起始位置應該正確，然后再按通電源開關。
可見分光光度計
721可見分光光度計其波長范圍360～800nm，色散元件為三角棱形.
1.檢查儀器各調節鈕的起始位置是否正確，接通電源開關，打開樣品室暗箱蓋，使電表指針處于“0”位，預熱20min后，再選擇須用的單色光波長和相應的放大靈敏度檔，用調“0”電位器調整電表為T=0％。
2.蓋上樣品室蓋使光電管受光，推動試樣架拉手，可見分光光度計使參比溶液池（溶液裝入4／5高度，置第一格）置于光路上，調節100％透射比調節器，使電表指針指T＝100％。
3.重復進行打開樣品室蓋，調0，蓋上樣品室蓋，調透射比為100％的操作至儀器穩定。
4.蓋上樣品室蓋，推動試樣架拉手，使樣品溶液池置于光路上，讀出吸光度值。讀數后應立即打開樣品室蓋。
5.測量完畢，取出比色皿，洗凈后倒置于濾紙上晾干。各旋鈕置于原來位置，電源開關置于“關”，拔下電源插頭。
6.可見分光光度計放大器各檔的靈敏度為：“l” ×1倍；“2”×10倍；“3”×20倍，靈敏度依次增大。由于單色光波長不同時，光能量不同，需選不同的靈敏度檔。選擇原則是在能使參比溶液調到T＝ 100％處時，盡量使用靈敏度較低的檔，以提高儀器的穩定性。改變靈敏度檔后，應重新調“0”和“100”。
