熒光分析法能提供包含激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、發(fā)光強(qiáng)度、發(fā)光壽命、熒光偏振等信息，是痕量分析領(lǐng)域一種重要的分析方法。本文以棱光F95S熒光分光光度計(jì)為例，說明熒光分光光度計(jì)測(cè)定液體樣品熒光值和繪制熒光光譜曲線的具體步驟。
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一、測(cè)定液體狀樣品的熒光值
1、按下儀器總電源開關(guān)。
2、主機(jī)預(yù)熱 30 分鐘。
3、旋轉(zhuǎn)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)旋鈕至所需波長(zhǎng)。
4、按“模式”選擇鍵，進(jìn)入主菜單界面，選擇執(zhí)行熒光值測(cè)定功能。
5、準(zhǔn)備樣品：熒光樣品池一盛蒸餾水或去離子水作參比（或試劑空白、參比溶液），熒光樣品池二盛所需測(cè)定樣品溶液，分別用試鏡紙將四壁擦拭干凈。
6、靈敏度設(shè)定：打開樣品室蓋，樣品池二置入樣品座上，合上樣品室蓋。然后按“歸一”調(diào)整鍵調(diào)節(jié)至LCD 液晶顯示窗顯示熒光值顯示在 10-100 左右之間，記下此時(shí)的靈敏度檔位。
7、調(diào)零：打開樣品室蓋，樣品池一置入樣品座上，合上樣品室蓋。然后按“調(diào)零”調(diào)整鍵，儀器自動(dòng)調(diào)整0%，至LCD 液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%止。如發(fā)現(xiàn) 0%有漂移，繼續(xù)按下調(diào)零調(diào)整鍵，直至LCD液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%為止。
8、放入待測(cè)樣品：打開樣品室蓋，取出樣品池一，然后把樣品池二放入樣品池座，合上樣品室蓋。
9、讀數(shù)：等數(shù)值穩(wěn)定下來之后顯示的數(shù)值就是該待測(cè)樣品的熒光值，由 LCD 液晶顯示窗讀出儀器測(cè)得的樣品熒光值，并記錄。
10、繼續(xù)測(cè)定其它樣品，或關(guān)閉儀器總電源開關(guān)。
二、繪制液體狀樣品的熒光光譜曲線
1、按下儀器總電源開關(guān)。
2、主機(jī)預(yù)熱 30 分鐘。
3、旋轉(zhuǎn)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)旋鈕至所需波長(zhǎng)。
4、按“模式”選擇鍵，進(jìn)入主菜單界面，選擇執(zhí)行熒光值測(cè)定功能。
5、準(zhǔn)備樣品：熒光樣品池一盛蒸餾水或去離子水作參比（或試劑空白、參比溶液），熒光樣品池二盛所需測(cè)定樣品溶液，分別用試鏡紙將四壁擦試干凈。
6、靈敏度設(shè)定：打開樣品室蓋，樣品池二置入樣品座上，合上樣品室蓋。然后按“歸一”調(diào)整鍵，調(diào)節(jié)至LCD液晶顯示窗顯示熒光值顯示在 10-100 左右之間，記下此時(shí)的靈敏度檔位。
7、調(diào)零：打開樣品室蓋，樣品池一置入樣品座上，合上樣品室蓋。然后按“調(diào)零”調(diào)整鍵，儀器自動(dòng)調(diào)整 0%，至LCD液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%止。如發(fā)現(xiàn) 0%有漂移，繼續(xù)按下調(diào)零調(diào)整鍵，直至LCD液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%為止。
8、放入待測(cè)樣品并讀數(shù)：打開樣品室蓋，取出樣品池一，然后把樣品池二放入樣品池座，合上樣品室蓋。等數(shù)值穩(wěn)定下來之后顯示的數(shù)值就是該待測(cè)樣品的熒光值，由 LCD 液晶顯示窗讀出儀器測(cè)得的樣品熒光值，并記錄。
9、在要求測(cè)量的波長(zhǎng)范圍內(nèi)按所需間隔逐點(diǎn)重復(fù)執(zhí)行上述（7）-（8）步驟，記錄每個(gè)波長(zhǎng)點(diǎn)及其相應(yīng)的熒光值。
10、作圖：取一座標(biāo)紙，X 軸為波長(zhǎng)，Y 軸為熒光值，在要求測(cè)量的波長(zhǎng)范圍內(nèi)將每一組數(shù)據(jù)標(biāo)記在座標(biāo)紙上，用曲線尺光滑地連接各數(shù)據(jù)點(diǎn)即可得到待測(cè)樣品溶液的熒光光譜曲線圖譜。
11、繼續(xù)測(cè)定其它樣品，或關(guān)閉儀器總電源開關(guān)。
（內(nèi)容來源上海棱光網(wǎng)）
