一、液固吸附色譜法（LSC）
流動相為液體，固定相為固體吸附劑。
1、分離機制：利用溶質分子占據固定相表面吸附活性中心能力差異；
分離前提：K不等或k不等；
2、固定相：與LC比，固定相粒徑不同（<10μm）；
3、流動相：底劑（烷烴）+有機極性調節劑。
4．影響K的因素：
與固定相性質和流動相性質有關；
溶質分子極性↑，洗脫能力↓，k↑，tR↑；
溶劑系統極性↑，洗脫能力↑，k↓，tR↓；
注：調節溶劑極性，可以控制組分的保留時間；
5、出柱順序：強極性組分后出柱，弱極性組分先出柱；
6、硅膠吸水量↑，LSC→LLC
硅膠含水量較小，吸附色譜，硅膠極性較大；
硅膠含水量>17% ，分配色譜，硅膠失活→載體；
吸附的水→固定液
二、液-液分配色譜法（LLC）
1、分離機制：利用組分在兩相中溶解度的差異
2、固定相：載體+固定液（物理或機械涂漬法）
缺點：
系統內部壓力大，易流失，不實用
固定液-極性→NLLC
固定液-非極性→RLLC
3、①正相色譜-固定液極性>流動相極性（NLLC）
極性小的組分先出柱，極性大的組分后出柱：適于分離極性組分；
②反相色譜-固定液極性<流動相極性（RLLC）
極性大的組分先出柱，極性小的組分后出柱：適于分離非極性組分；
三、化學鍵合相色譜法（BPC）
1、化學鍵合相
（1）分離機制：分配+吸附（以LLC為基礎）；
（2）特點：不易流失；熱穩定性好；化學性能好；載樣量大；適于梯度洗脫；
2、反相鍵合相色譜
（1）分離機制：疏溶劑理論；
正相-流動相與溶質排斥力強，作用時間↑，K↑，組分tR↑；
反相-流動相與溶質排斥力弱，作用時間↓，K↓，組分tR↓；
（2）固定相：極性小的烷基鍵合相；
C8柱，C18柱（ODS柱-HPLC約80%問題）；
（3）流動相：
極性大的甲醇-水或乙腈-水；
流動相極性>固定相極性；
底劑+有機調節劑（極性調節劑）；
例：水+甲醇，乙腈，THF；
（4）流動相極性與k的關系：流動相極性↑，洗脫能力↓，k↑，組分tR↑
（5）出柱順序：極性大的組分先出柱；極性小的組分后出柱；
（6）適用：非極性~中等極性組分（HPLC 80%問題）
3、正相鍵合相色譜
(1)分離機制：溶質分子與固定相之間定向作用力、誘導力、或氫鍵作用力
(2)固定相：極性大的氰基或氨基鍵合相；
(3)流動相：極性�。ㄍ琇SC）；底劑+有機極性調節劑； 例：正己烷+氯仿-甲醇，氯仿-乙醇。
(4)流動相極性與K的關系：流動相極性↑，洗脫能力↑，組分tR↓，k↓；
(5)出柱順序：結構相近組分，極性小的組分先出柱，極性大的組分后出柱；
(6)適用：氰基鍵合相與硅膠的柱選擇性相似（極性稍�。蛛x物質也相似；氨基鍵合相與硅膠性質差別大，堿性，分析極性大物質、糖類等；
4、離子對色譜和離子抑制色譜
反相離子對色譜法（IPC或PIC）
反相色譜中，在極性流動相中加入離子對試劑，使被測組分與其中的反離子形成中性離子對，增加K和tR，以改善分離；
(1)離子對試劑：烷基磺酸鈉→分析堿，四丁基季胺鹽→分析酸
(2)影響K的因素:
a．與m的極性有關（同反相色譜）；
b．與R的鏈長有關：R↑長，極性↓小，tR↑，k↑；
(3)適用：
較強的有機酸、堿；反相離子抑制色譜；
在反相色譜中，通過加入緩沖溶液調節流動相pH值，抑制；
組分解離，增加其K和tR，以達到改善分離目的；
1）離子抑制劑：弱酸、弱堿性物質； pH一定的緩沖溶液；
2）K的影響因素：與流動相極性有關，還與pH值有關；
選擇流動相：應同時考慮極性及pH值；
酸性物質-加入酸HAc，tR↑，K↑；
堿性物質-加入堿NH3·H2O，tR↑，K↑；
調節pH范圍：3.0~8.0；pH>8.0破壞鍵合相與載體的結合；pH<3.0腐蝕柱子；
3）適用：
極弱酸堿物質；pH=3~7弱酸；pH=7~8弱堿；兩性化合物。
（內容參考小木蟲論壇）
