一、色譜柱的平衡
反向色譜柱在經(jīng)過出廠測(cè)試后是保存在甲醇（或乙腈）/水中的。請(qǐng)一定確保您所使用的流動(dòng)相和醇（或乙腈）/水互溶，由于色譜柱在運(yùn)輸過程中可能會(huì)干掉，因此在用流動(dòng)相分析樣品之前，應(yīng)使用分10-20倍的體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱。
如果您所使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽，應(yīng)注意用含水量很高（約95%）的流動(dòng)相過渡 ，樣品分析完后， 沖洗柱子是亦然。 過去傳統(tǒng)的方法使用純水沖洗，對(duì)于非極性柱， 如C8或 C18 ，由于純水不能浸潤(rùn)填料表面而沖倒碳鏈，造成柱效下降。
另外，分析樣品時(shí)，由于純水在填料表面不能浸潤(rùn)形成水膜，出現(xiàn)樣品不保留而分不開，重現(xiàn)性差，所以對(duì)于一般的 C18或 C8，有機(jī)溶劑不能低于5%。硅膠柱或極性色譜柱在
經(jīng)過出廠測(cè)試后是保存在正庚烷中的。如果該色譜柱需要使用含水或甲醇或乙腈的流動(dòng)相，
請(qǐng)?jiān)谑褂昧鲃?dòng)相之前用乙醇或異丙醇平衡。
那么如何平衡色譜柱？
平衡過程中，將流速緩慢地提高用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線（緩沖鹽或
離子對(duì)試劑濃度如果較低，則需要較長(zhǎng)的時(shí)間平衡） 。
二、色譜柱的再生
建議用來沖洗的溶劑體積
色譜柱規(guī)格 | 柱體積 | 溶劑體積 |
150×4.6 | 2.50ml | 50ml |
250×4.6 | 5.0ml | 100ml |
250×10 | 20ml | 400ml |
請(qǐng)根據(jù)下述選擇您的再生方法：
極性固定相(如 Si，NH2，Diol 色譜填料)的再生：正庚烷—氯仿—乙酸乙酯—丙酮—乙醇—
水
非極性固定相（如反向填料 C18，C8等）的再生：水—乙腈—氯仿（或異丙醇）—乙腈—水
