高效液相色譜儀主要有分析型、制備型和專用型三類。一般由五個部分組成，分別是高壓輸液系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。
一. 高壓輸液系統(tǒng)
由貯液裝置、高壓輸液泵、過濾器、脫氣裝置等組成。
1. 貯液器：貯液器用于存放溶劑。溶劑必須很純，貯液器材料要耐腐蝕，對溶劑呈惰性。貯液器應(yīng)配有溶劑過濾器，以防止流動相中的顆粒進入泵內(nèi)。溶劑過濾器一般用耐腐蝕的鎳合金制成，空隙大小一般為2mm。
2. 脫氣裝置：脫氣的目的是為了防止流動相從高壓柱內(nèi)流出時，釋放出氣泡進入檢測器而使噪聲劇增，甚至不能正常檢測。
3. 高壓輸液泵：高壓輸液泵是高效液相色譜儀的重要部件，是驅(qū)動溶劑和樣品通過色譜柱和檢測系統(tǒng)的高壓源，其性能好壞直接影響分析結(jié)果的可靠性。
對高壓泵的基本要求是：
①流量穩(wěn)定；②輸出壓力高，最高輸出壓力為50Mpa；③流量范圍寬，可在0.01～10ml／min范圍任選。④耐酸、堿、緩沖液腐蝕。⑤壓力波動小。
二. 進樣器
進樣器一般要求密封性好，死體積小，重復性好，保證中心進樣，進樣時對色譜系統(tǒng)的壓力和流量波動小，并便于實現(xiàn)自動化。
高壓進樣閥是目前廣泛采用的一種方式。閥的種類很多，有六通閥、四通閥，雙路閥等。以六通進樣閥最為常用。
三.分離系統(tǒng)
色譜分離系統(tǒng)包括色譜柱、固定相和流動相。色譜柱是其核心部分，柱應(yīng)具備耐高壓、耐腐蝕、抗氧化、密封不漏液和柱內(nèi)死體積小、柱效高、柱容量大、分析速度快、柱壽命長的要求。通常采用優(yōu)質(zhì)不銹鋼管制成。
色譜柱按內(nèi)徑不同可分為常規(guī)柱、快速柱和微量柱三類。
常規(guī)分析柱柱長一般為10~25cm，內(nèi)徑4 ~ 5mm，固定相顆粒直徑為 5 ~ 10 mm。為了保護分析柱不受污染，一般在分析柱前加一短柱，約數(shù)厘米長，稱為保護柱。
（微量分析柱內(nèi)徑小于l mm，凝膠色譜往內(nèi)徑3～12 mm，制備往內(nèi)徑較大，可達25 mm以上。）
四. 檢測系統(tǒng)
檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測的信號，常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學發(fā)光等。
1. 紫外可見吸收檢測器（ultraviolet－visibledetector，UVD）
紫外可見吸收檢測器（UVD）是HPLC中應(yīng)用最廣泛的檢測器之一，幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點是靈敏度較高，線性范圍寬，噪聲低，適用于梯度洗脫，對強吸收物質(zhì)檢測限可達1ng，檢測后不破壞樣品，可用于制備，并能與任何檢測器串聯(lián)使用。紫外可見檢測器的工作原理與結(jié)構(gòu)同一般分光光度計相似，實際上就是裝有流動地的紫外可見光度計。
（1）紫外吸收檢測器
紫外吸收檢測器常用氘燈作光源，氘燈則發(fā)射出紫外-可見區(qū)范圍的連續(xù)波長，并安裝一個光柵型單色器，其波長選擇范圍寬（190nm～800nm）。它有兩個流通池，一個作參比，一個作測量用，光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上，若兩流通池都通過純的均勻溶劑，則它們在紫外波長下幾乎無吸收，光電管上接受到的輻射強度相等，無信號輸出。當組分進入測量池時，吸收一定的紫外光，使兩光電管接受到的輻射強度不等，這時有信號輸出，輸出信號大小與組分濃度有關(guān)。
局限：流動相的選擇受到一定限制，即具有一定紫外吸收的溶劑不能做 流動相，每種溶劑都有截止波長，當小于該截止波長的紫外光通過溶劑時，溶劑的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收檢測器的工作波長不能小于溶劑的截止波長。
（2）光電二極管陣列檢測器（photodiode array detector， PDAD）
也稱快速掃描紫外可見分光檢測器，是一種新型的光吸收式檢測器。它采用光電二極管陣列作為檢測元件，構(gòu)成多通道并行工作，同時檢測由光柵分光，再入射到陣列式接收器上的全部波長的光信號，然后對二極管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù)，得到吸收值(A)是保留時間(tR)和波長(l)函數(shù)的三維色譜光譜圖。由此可及時觀察與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù)，從而迅速決定具有最佳選擇性和靈敏度的波長。
